北京吉瑞森科技有限責任公司&南通海箬化學有限公司

    DOWEX系列離子交換色譜分離樹脂有強酸性陽離子交換樹脂和強堿性陰離子交換樹脂兩大類，每一類又根據(jù)交聯(lián)度（即DVB%）的不同劃分為3個小類，分別以“×2”、 “×4”與“×8”表示，在此基礎上進一步提供3個粒度范圍可供選擇，即150-300μm（50-100目）、75-150μm（100-200目）以及35-75μm（200-400目），共計18個樹脂牌號。此外，Dow化學公司又提供了一個雙功能基離子交換色譜分離樹脂——DOWEX Retardion 11A8 50 - 100 mesh（含弱酸基團與強堿基團），因此，本系列產(chǎn)品共有19個牌號的樹脂可供客戶選擇。顯然，不同交聯(lián)度的樹脂含水量不一，體積交換量、物質(zhì)擴散的阻力各異，如此寬泛的產(chǎn)品范圍豐富了客戶的試用選擇，可以針對具體的應用優(yōu)選出適宜的色譜分離樹脂。

   DOWEX樹脂-離子交換色譜填料系列離子交換色譜分離樹脂的骨架材料均為苯乙烯——二乙烯苯，采用特殊的懸浮聚合工藝大規(guī)模制備而得，具有良好的化學、物理穩(wěn)定性。易裝柱，目標組份擴散阻力小，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定。因此，DOWEX系列離子交換色譜分離樹脂不僅可以滿足實驗室食品、藥品等精細化工產(chǎn)品的小試工藝開發(fā)，也使得工藝的放大更為輕松。

樹脂牌號 酸堿性 粒度范圍 

μm 出廠離子形態(tài) 含水量 

% 體積交換量 

eq/L

DOWEX 50W×2 強酸性 150-300 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強酸性 75-150 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×2 強酸性 35-75 H+ 74-82 0.6

DOWEX 50W×4 強酸性 150-300 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強酸性 75-150 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×4 強酸性 35-75 H+ 74-82 1.1

DOWEX 50W×8 強酸性 150-300 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強酸性 75-150 H+ 74-82 1.7

DOWEX 50W×8 強酸性 35-75 H+ 74-82 1.7

DOWEX 1×2 強堿性 150-300 Cl- 65-75 0.7

DOWEX 1×2 強堿性 75-150 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×2 強堿性 35-75 Cl- 70-80 0.6

DOWEX 1×4 強堿性 150-300 Cl- >50 1.0

DOWEX 1×4 強堿性 75-150 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×4 強堿性 35-75 Cl- 55-63 1.0

DOWEX 1×8 強堿性 150-300 Cl- 43-48 1.2

DOWEX 1×8 強堿性 75-150 Cl- 39-45 1.2

DOWEX 1×8 強堿性 35-75 Cl- 39-45 1.2

DOWEX Retardion 11A8 50-100mesh 弱酸、強堿性 150-300 -COOH –N(CH3)3 43-48 1.1

1.2

離子交換層析法分離氨基酸

DOWEX樹脂-離子交換色譜填料實驗原理

離子交換層析法主要是根據(jù)物質(zhì)的解離性質(zhì)的差異而選用不同的離子交換劑進行分離的方法。各種氨基酸分子的結(jié)構(gòu)不同，在同一pH時與離子交換樹脂的親和力有差異，因此可依據(jù)親和力從小到大的順序被洗脫液洗脫下來，達到分離的效果。

試劑 和器材

一、 試劑 與材料

苯乙烯磺酸鈉型樹脂（強酸1×8，100—200目）；2mol/L鹽酸溶液；2mol/L氫氧化鈉溶液。

標準氨基酸溶液：天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸均配制成2mg/mL的0.1mol/L的鹽酸溶液。

混合氨基酸溶液：將3種標準氨基酸溶液按1∶2.5∶10的比例混合。

檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖液（pH5.8，鈉離子濃度0.45mol/L）：取檸檬酸（C6O7H8?H2O）14.25g，氫氧化鈉9.30g和濃鹽酸5.25mL溶于少量水后，定容至500mL，冰箱保存。

顯色劑：2g的水合茚三酮溶于75mL乙二醇單甲醚中，加水至100mL。

二、器材

20cm×1cm層析管; 恒壓洗脫瓶; 部分收集器; 分光光度計。

操作方法

一、樹脂的處理

將干的強酸型樹脂用蒸餾水浸泡過夜，使之充分溶脹。用4倍體積的2mol/L的鹽酸浸泡1小時，傾去清液，洗至中性。再用2mol/L的氫氧化鈉處理，做法同上。后用欲使用的緩沖液浸泡。

二、裝柱

取直徑1cm,長度10－12cm的層析柱。將柱垂直至于鐵架上。自頂部注入上述經(jīng)處理的樹脂懸浮液，關閉層析柱出口，待樹脂沉降后，放出過量溶液，再加入一些樹脂，至樹脂沉降至8 ~ 10cm的高度即可。

三、氨基酸的洗脫

用pH5.8的檸檬酸緩沖液沖洗平衡交換柱。調(diào)節(jié)流速為0.5mL/min，流出液達到床體積的4倍時即可上樣。由柱上端仔細加入氨基酸的混合液0.25—0.5mL，同時開始收集流出液。當樣品液彎月面靠近樹脂頂端時，即刻加入0.5mL檸檬酸緩沖液沖洗加樣品處。待緩沖液彎月面靠近樹脂頂端時，再加入0.5mL緩沖液。如此重復兩次，然后用滴管小心注入檸檬酸緩沖液（切勿攪動床面），并將柱與洗脫瓶和部分收集器相連。開始用 試管 收集洗脫液，每管收集1mL，共收集60—80管。

四、氨基酸的鑒定

向各管收集液中加1mL水合茚三酮顯色劑并混勻，在沸 水浴 中準確加熱15min后冷卻至室溫，再加入1.5mL的50%乙醇溶液。放置10分鐘。以收集液第2管為空白，測定A570波長的光吸收值，以光吸收值為縱坐標，以洗脫液體積為橫坐標繪制洗脫曲線。以已知3種 氨基酸 的純?nèi)芤簶悠罚瓷鲜龇椒ê蜅l件分別操作，將得到的洗脫液曲線與混合 氨基酸 的洗脫曲線對照，可確定3個峰的大致位置及各峰為何種氨基酸。

WATERS、RESTEK、COSMOSIL、YMC、SIMON等色譜柱和色譜填料、固相萃取柱、氘燈等 
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